【佳學(xué)基因檢測】基因檢測技術(shù)大全：雙脫氧DNA測序技術(shù)

基因測序技術(shù)是當(dāng)今賊熱門的分子診斷技術(shù)之一，它通過獲取盡可能多的核酸序列，并對其所能帶來的價(jià)值進(jìn)行分析，基因測序技術(shù)一定發(fā)展到第四代。

第一代測序技術(shù)是傳統(tǒng)的DNA一代測序技術(shù)以Sanger雙脫氧末端終止法為代表。該方法通過凝膠電泳區(qū)分長度不同的DNA片段，從而判斷堿基排列情況。一代測序技術(shù)在遺傳病致病基因的克隆、遺傳病的基因診斷、人類基因組計(jì)劃的實(shí)施等方面起到了重要作用，目前仍是判定測序結(jié)果正確性的金標(biāo)準(zhǔn)。由于存在較長時(shí)間的電泳環(huán)節(jié)，測序效率低，數(shù)據(jù)產(chǎn)率低。以此為基礎(chǔ)的測序儀器被個(gè)別公司壟斷。

以Sanger為基礎(chǔ)開發(fā)的第一代測序儀器的核心技術(shù)有三個(gè)：一是酶法合成DNA，二是標(biāo)記末端核苷酸的終止；三是用凝膠電泳的方法將新合成的核苷酸鏈按合成終止時(shí)的長度分開；四、是實(shí)現(xiàn)分離后檢測DNA片段?；诿?xì)管電泳的全自動桑格法測序儀由于讀取長度、通量、正確度等優(yōu)點(diǎn)，目前仍有一定的市場，多用于序列驗(yàn)證(不同方法)、法醫(yī)鑒定(更正確)等。這種儀器市場的長遠(yuǎn)發(fā)展，要看二代測序儀的技術(shù)優(yōu)勢能否全面顛覆，以及儀器制造商是否盈利。

這一代測序原理很簡單清楚，通過鏈?zhǔn)浇K止法來讀取序列信息(想知道怎么測的自己百度sanger測序)。我估計(jì)這個(gè)東西的成本不高，我們在實(shí)驗(yàn)室送公司的外包測序一次反應(yīng)10塊錢測800bp，一次刨除人力成本我不知道還剩幾塊錢。并且這款很好，市場上各種阿貓阿狗公司都會來推銷他們的排序服務(wù)。

這種分析技術(shù)是分子生物學(xué)的重要基礎(chǔ)技術(shù)。ABI公司的序列儀為例，用4種熒光染料對端子和引物進(jìn)行標(biāo)記，并用Sanger測序反應(yīng)得到不同的熒光標(biāo)記。每個(gè)樣本的4個(gè)測序反應(yīng)產(chǎn)物都可以在同一泳道內(nèi)電泳，從而減少不同測序泳道間遷移率的差異對正確度的影響。同時(shí)，采用同步掃描技術(shù)對各熒光標(biāo)記片段進(jìn)行電泳分離，激發(fā)熒光經(jīng)光柵分光，識別不同堿基信息的不同顏色熒光，并在CCD照相機(jī)上同步成像。計(jì)算機(jī)可以在電泳過程中同步檢測儀器的運(yùn)行狀態(tài)，并能以電泳、熒光吸收峰圖、堿基的排列次序等方式輸出。這是一種測序技術(shù)的基本原理。

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